题目：odd skipped-related 2 as a novel mark for labeling the proximal convoluted tubule within the zebrafish kidney

原文链接:https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/38496848/

期刊：Heliyon

摘要

肾脏的近端曲细管（PCT）是肾脏中负责重吸收、分泌以及维持肾小管内电解质和水平衡的关键功能区段。然而，目前缺乏用于研究近端曲细管形态发生的明确内源性转基因品系。通过分析成年斑马鱼肾脏的单细胞转录组数据，我们在近端曲细管中检测到了奇数Skipped相关2（osr2，编码一种奇数Skipped锌指转录因子）的表达。为探究osr2在近端曲细管形态发生中的作用，我们构建了斑马鱼转基因品系Tg(osr2:EGFP)，该品系可表达增强型绿色荧光蛋白（EGFP）。EGFP的表达模式与内源性Osr2的表达模式高度一致，能够忠实再现其天然表达谱。在肾脏发育过程中，我们可通过EGFP追踪近端曲细管的发育过程，且该特性在成年斑马鱼中也得以保留。此外，被osr2:EGFP标记的斑马鱼近端曲细管片段长度较短且重叠现象少见，便于对肾单位进行计数。Tg(osr2:EGFP)转基因品系的构建同时会导致osr2的活性被破坏。值得注意的是，研究结果表明osr2失活对Tg(osr2:EGFP)斑马鱼肾单位的发育和再生无明显影响。总体而言，该斑马鱼转基因品系的建立为近端曲细管的遗传学和化学分析研究提供了极具价值的工具。

引言

近端小管（PT）是肾单位的关键组成部分，负责对肾小球滤过液进行大部分的重吸收与处理工作。它包含两个不同的节段：近端曲管（PCT）和近端直小管（PST）。在哺乳动物体内，PCT 以其卷曲的结构为特征，而 PST 则呈直形，无卷曲结构。功能上，两个节段承担相似的作用，包括水、葡萄糖、氨基酸和离子的重吸收，以及代谢废物的排泄。不过，这些功能主要由 PCT 完成，PST 的贡献相对有限。受损的 PCT 细胞在急性肾损伤（AKI）、慢性肾病和糖尿病肾病的发病机制中发挥关键作用。鉴于斑马鱼与哺乳动物 PCT 之间基因的高度保守性，斑马鱼模型对于研究 PCT 的发育和疾病具有重要价值。组织特异性转基因技术已成为研究组织发育的宝贵工具。在斑马鱼中，已构建出多种携带荧光蛋白的转基因品系，用于可视化肾脏器官的形态发生。例如，转基因品系 Tg(cdh17:DsRed)（品系编号：ZDB-FIG-230223-3）可标记肾小管。Tg(dβh:GFP) 斑马鱼品系利用多巴胺β羟化酶（dβh）启动子驱动绿色荧光蛋白（GFP）的表达，以此标记近端小管的发育。另一转基因品系 Tg(ret1:GFP) 由 ret 基因位点驱动 GFP 表达，可标记最远端的前肾管。表达 GFP 的 ET33-D10 斑马鱼品系可标记近端小管。此外，Tg(gtshβ:GFP) 斑马鱼品系在石斑鱼gtshβ启动子详细介绍了转基因斑马鱼品系中垂体催乳素细胞（PCT）的发育过程。尽管取得了这些进展，但用于可视化催乳素细胞发育和形态发生的特异性内源性转基因品系仍较为缺乏。

编码锌指蛋白的osr2基因在小鼠等高等脊椎动物中被检测到。对小鼠osr2突变株的研究表明，该基因在内胚层、腭、骨骼、牙齿以及四肢滑膜关节的正常模式形成中发挥着关键作用。值得注意的是，osr2已被证实是腭发育的关键调控因子，也是与人类腭裂形成相关的潜在候选基因。此外，osr2在肾脏中表达，且在非洲爪蟾和斑马鱼的基因组中也发现了该基因的存在，其似乎在一定程度上参与肾脏的形成过程。以往研究证实，osr2是斑马鱼原肾发育所必需的，这一点可从osr2在原肾中的表达以及osr2敲低胚胎出现心包水肿得到证明。然而，也有研究得出了相反的结论，即osr2敲低胚胎的肾脏发育并未出现异常。因此，还需进一步的研究证据来明确osr2的具体作用。

本研究利用CRISPR/Cas9敲入技术成功构建了Tg(osr2:EGFP)转基因斑马鱼品系。研究结果表明，osr2可作为近端曲小管（PCT）的可靠标记物，Tg(osr2:EGFP)肾脏中的EGFP表达能够实现对近端曲小管的标记。值得注意的是，肾单位的结构复杂性为其计数带来了挑战。传统上，原位杂交技术被用于肾单位计数，但该方法耗时且操作复杂。相比之下，osr2:EGFP标记的片段长度较短且重叠现象少见，为高效计数肾单位提供了实用优势。此外，研究发现，在Tg(osr2:EGFP)转基因鱼中敲除osr2不会对肾脏的发育和再生产生不利影响，实验结果与对照组相当。综上，本研究凸显了Tg(osr2:EGFP)斑马鱼品系作为创新资源的应用价值，可用于遗传或化学背景下近端曲小管的发育、再生及相关研究。

结果

osr2在斑马鱼PTECs中的表达

为了研究osr2在斑马鱼肾脏中的表达模式，我们对以前发表的单细胞进行了再分析RNA测序（scRNA-seq）数据（GSE100910）。对单细胞RNA测序数据的分析显示，osr2在近端小管上皮细胞（PTECs）中表达（图1A和B）。由于近端小管（PT）包含近曲小管（PCT）和远曲小管（PST），我们旨在进一步验证osr2在斑马鱼肾脏近端小管中的表达模式。为此，基于在近曲小管（PCT）中特异性高表达的标记基因slc20a1a，以及在远曲小管（PST）中特异性高表达的标记基因slc13a1和slc13a3，利用Seurat软件（4.2.0版本）将近端小管上皮细胞群分为远曲小管细胞（PSTCs）和近曲小管细胞（PCTCs）亚群（图1C）。值得注意的是，分析结果表明osr2的表达定位于斑马鱼肾脏的近曲小管（图1F）。此外，热图展示了多个近曲小管标记基因的表达情况，包括osr2、slc20a1a、slc6a19b、epdl2、slc7a7、slc34a1a等（图1D）。既往研究已证实slc20a1a是近曲小管的标记基因，本研究结果与这一发现一致，表明slc20a1a和osr2均在近曲小管中表达（图1D-F）。综上，这些研究结果提示osr2可作为一种有价值的新型标记基因，用于近曲小管的特征鉴定与相关研究。

图1. osr2在斑马鱼肾脏中的表达模式。A-B：单细胞RNA测序分析显示osr2在近端小管上皮细胞中表达。tSNE图展示了斑马鱼肾细胞簇及osr2的表达情况。造血干细胞（HSCs）、肾祖细胞（KPs）、肾多纤毛细胞（KM）、髓系巨噬细胞（MM）、肾黏蛋白细胞（KM）、血管内皮细胞（VECs）、远端小管上皮细胞（DTECs）、近端小管上皮细胞（PTECs）。C：远端小管上皮细胞簇被分为近端直小管细胞（PSTCs）和近端曲小管细胞（PCTCs）亚群。D：热图展示了C中近端曲小管细胞或近端直小管细胞部分基因的相对对数表达量。E-F：各亚群中slc20a1a和osr2的表达分析。近端曲小管上皮细胞（PCTCs）、近端直小管上皮细胞（PSTCs）。 

斑马鱼中osr2:EGFP可作为近端曲小管的标记物

为进一步确定osr2能否作为PCT标记物，我们设计了靶向斑马鱼osr2第二内含子的短向导RNA（sgRNA）。随后，我们将该sgRNA与zCas9 mRNA共注射到单细胞阶段的斑马鱼胚胎中，切割效率约为16%。接下来，我们构建了供体质粒osr2-P2A-GFF，该质粒由四部分组成：左臂、P2A-GFF编码序列、右臂和crayy-EGFP（图2A）。该方法实现了整个供体质粒片段的敲入（基因组位置：GRCz11；16号染色体：54404070–54404071；基因ID：ENSDARG00000038006），从而获得TgKI(osr2:GFF)斑马鱼（图2B；图S1），相关细节已提交至斑马鱼数据库ZFIN（品系ID：ZDB-ALT-231019-1）。对F1子代的PCR和测序分析验证了其各自F0奠基者的基因组整合可遗传，且携带osr2−12（内含子中12个碱基对缺失）的TgKI(osr2:GFF)斑马鱼被用于后续的保种和实验（图2C；图S2）。随后，我们通过逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测了TgKI(osr2:GFF)纯合子和野生型（WT）斑马鱼中osr2的转录情况（图2D、E），未在TgKI(osr2:GFF)纯合子中检测到完整的osr2转录本。因此，TgKI(osr2:GFF)纯合子中osr2的完整阅读框被破坏。鉴于GFF可通过其识别序列（上游激活序列，UAS）激活转录，位于UAS下游的基因可在表达GFF的细胞中表达。Tg(UAS:EGFP)转基因报告鱼在UAS下游携带EGFP基因，可在GFF阳性的细胞和组织中特异性表达EGFP。我们将TgKI(osr2:GFF)与Tg(UAS:EGFP)杂交，获得TgKI(osr2:GFF)×Tg(UAS:EGFP)，简写为Tg(osr2:EGFP)，并在胚胎的前肾区域观察到EGFP的表达（图2F、G）。根据其表达模式和形态特征，我们推测表达EGFP的定位于近端曲小管（PCT）内。为进一步验证这一点，我们采用近端曲小管经典标记物slc20a1a的整体原位杂交（WISH）作为参照，验证osr2:EGFP的表达区域为近端曲小管。结果显示，slc20a1a与osr2:EGFP在同一位置表达，表明osr2:EGFP可标记近端曲小管（图2H–K），这与单细胞数据分析的结果一致。

图2. 内含子靶向介导的供体质粒在斑马鱼osr2基因座的敲入。A：利用CRISPR/Cas9系统在斑马鱼osr2基因座构建GFF敲入的内含子靶向介导策略示意图。sgRNA靶序列以红色显示，原间隔区相邻基序（PAM）序列以绿色标注。供体质粒的左右臂序列由棕色线条表示，左臂长度为840 bp，右臂长度为840 bp。将供体质粒与zCas9 mRNA和sgRNA共注射后，整个供体质粒片段被整合到osr2基因座中。斑马鱼osr2基因包含4个外显子，E2、E3和E4分别代表第2、3和4外显子。B：对3#首建者F1后代的3'和5'连接区进行PCR分析。F1、R1、F2和R2引物在A中已标注。C：四个供体质粒敲入F0首建者F1后代的5'连接区序列。插入缺失突变以红色高亮显示。D：TgKI(osr2:GFF)和野生型（WT）斑马鱼中osr2的转录示意图。E：采用RT-PCR验证TgKI(osr2:GFF)和野生型斑马鱼中osr2和GFF的转录情况（每组(n=3)次生物学重复）。F：获得TgKI(osr2:GFF)纯合子、TgKI(osr2:GFF)杂合子及Tg(osr2:EGFP)转基因鱼的示意图。G：24小时胚胎期（hpf）Tg(osr2:EGFP)胚胎的体内共聚焦图像（背侧视图），红色箭头指示前肾中EGFP的表达。比例尺为500 μm。H-K：检测24 hpf胚胎中slc20a1a和EGFP的表达模式。H：24 hpf胚胎中slc20a1a表达模式的整体原位杂交（WISH）分析（侧视图）。I：24 hpf osr2:EGFP胚胎的体内共聚焦图像（侧视图），后肠以白色箭头头标注。J：24 hpf胚胎中slc20a1a表达模式的WISH分析（背侧视图）。K：24 hpf Tg(osr2:EGFP)胚胎的体内共聚焦图像（背侧视图）。hom，纯合子；het，杂合子；pA，多聚腺苷酸。H至K的比例尺为500 μm。（关于本图图例中颜色参考的解读，读者可查阅本文的网络版本。）

Tg(osr2:EGFP)斑马鱼胚胎发生过程中EGFP的动态表达模式

此前已有研究记录了osr2基因在斑马鱼胚胎发育过程中多种组织中的表达，包括前肾、胸鳍芽和肠道。为了验证Tg(osr2:EGFP)能否准确反映内源性osr2的表达情况，我们通过体视荧光显微镜对osr2:EGFP的表达模式进行了动态分析。通过观察，我们确定osr2:EGFP在近曲小管（PCT）中表达（图3A）。随着胚胎发育的进行，osr2:EGFP标记的近曲小管出现了逐渐聚集并向前卷曲的现象（图3B-D）。此外，在48小时至120小时胚胎发育阶段（hpf），胸鳍、第一咽弓和神经元中也检测到了osr2:EGFP的表达（图3A-D）。先前的研究表明，osr2最早在24小时胚胎发育阶段于后肠上皮细胞中表达，并在48小时胚胎发育阶段于后肠和肠间充质中表达。为进一步验证osr2:EGFP在肠道中表达，我们将Tg(osr2:EGFP)与特异性标记前肾近曲小管和远曲小管的Tg(cdh17:DsRed)进行杂交。结果显示，在48小时和72小时胚胎发育阶段，后肠中表达osr2:EGFP的细胞位于肾小管下方（图3E和F）。随着胚胎发育，后肠形态发生过程表现出逐渐聚集的特征（图3G和H）。综上，这些研究结果表明Tg(osr2:EGFP)转基因鱼能够准确反映内源性osr2的表达模式。

图3. Tg(osr2:EGFP)转基因品系整个胚胎发生过程中动态EGFP表达模式。A-D：分别展示了Tg(osr2:EGFP)胚胎在48小时pf、72小时pf、96小时pf和120小时pf时的原肾管背侧视图。在这些阶段，EGFP在原肾管区域（红色箭头头指示）以及胸鳍（白色箭头头指示）中表达。E-F：提供了不同发育阶段Tg(osr2:EGFP;cdh17:DsRed)胚胎的侧视图。可观察到后肠（白色箭头头）和肠腔（*）。het，杂合子。A至H的比例尺为500微米。（关于本图图例中颜色参考的解释，读者可参考本文的网络版本。）

Tg(osr2:EGFP)标记原肾管近端曲小管的形态发生

为了进一步明确 Tg(osr2:EGFP) 标记近端曲小管（PCT）形态发生的情况，我们采用共聚焦显微镜观察了 EGFP 在 PCT 中的表达模式。观察结果显示，发育中肾脏的 EGFP 荧光信号最初在约 20 小时胚胎期（hpf）于背侧上方可被检测到。至 24 小时胚胎期，EGFP 荧光延伸至卵黄囊上方，呈现出双侧管状结构（图 4A）。为了给 osr2 标记 PCT 形态发生提供更多证据，我们将 Tg(osr2:EGFP) 与 Tg(cdh17:DsRed) 进行杂交。随后，我们追踪了 24 至 120 小时胚胎期胚胎中 osr2:EGFP 和 cdh17:DsRed 的表达模式（图 4A–E）。结果表明，在整个胚胎发育过程中，EGFP 和 DsRed 在 PCT 中共表达（图 4），并持续至成体阶段。此前已有研究对 slc20a1a 表达的 PCT 从线性管状结构转变为卷曲结构的时间进程进行了表征。我们观察到的以 osr2:EGFP 为标记的 PCT 形态发生时间进程与这些研究结果一致。因此，结合单细胞分析、原位杂交和转基因斑马鱼的研究结果，我们认为 osr2 是 PCT 的一个新的标记基因。

图4. 在Tg(osr2:EGFP)胚胎中，原肾管（PCT）的形态发生由增强型绿色荧光蛋白（EGFP）标记。A-E：原肾管（PCT）细胞的背视图，同时被增强型绿色荧光蛋白（EGFP）和((n=6)) 微米标记。 

 osr2突变体不影响斑马鱼近端曲小管的发育

以往关于osr2在斑马鱼肾脏发育中作用的研究得出了相互矛盾的结果。因此，收集更多证据以明确osr2的影响至关重要。在我们的敲入策略中，整个供体质粒被整合到斑马鱼基因组中（图2A、B及补充图S1），导致纯合子TgKI(osr2:GFF)中osr2的完整阅读框被破坏（图2D、E）。因此，纯合子TgKI(osr2:GFF)为突变体，而上述发育研究使用的是杂合子TgKI(osr2:GFF)，其对胚胎发育未表现出任何可检测到的影响。为探究osr2突变体是否影响胚胎发生，我们使用体视显微镜观察了Tg(osr2:EGFP;cdh17:DsRed)斑马鱼胚胎的生长情况。结果显示，osr2失活的Tg(osr2:EGFP;cdh17:DsRed)斑马鱼胚胎中，近曲小管（PCT）和肾小管的形态与发育情况与对照组无明显差异（图5A–J）。此外，纯合子TgKI(osr2:GFF)斑马鱼的其他组织（第一咽弓、胸鳍和神经元细胞）也未发现明显缺陷。我们认为osr2失活对肾单位的发育无影响，这可能与osr2旁系同源基因的互补作用有关。此外，我们还检测到通过实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测了纯合子和野生型（WT）TgKI（osr2:GFF）斑马鱼胚胎及成年肾脏中osr2旁系同源基因osr1的转录水平，但未发现osr1信使核糖核酸（mRNA）出现明显上调（图5K）。综合来看，我们认为osr2基因的失活似乎对斑马鱼肾脏发育没有显著影响。

图5. (EGFP) 标记的成年斑马鱼肾脏损伤后细胞再生情况。A：成年斑马鱼腹腔注射庆大霉素构建急性肾损伤（AKI）模型的示意图。B：成年斑马鱼近端曲小管（PCT）细胞的共聚焦显微镜图像，该细胞由 osr2:EGFP 与 ((n=6))、((n=6))、((n=6))、(n=5) 标记（每组进行生物学重复）。纯合子（hom）；杂合子（het）。图A至图J的比例尺为500微米。

osr2:EGFP 成年斑马鱼为检测肾单位再生提供了一种有价值的工具

鱼类肾脏在损伤后具有全新再生肾单位的显著能力，这一过程被称为肾脏再生。在损伤刺激下，肾祖细胞（RPCs）会发生聚集，随后快速增殖并进一步分化为新的肾单位，为新肾单位的再生数量统计提供了基础。尽管肾单位再生具有重要意义，但由于肾单位结构本身的复杂性，目前仍缺乏便捷有效的肾单位再生数量统计方法。本研究结果显示，osr2:EGFP在整个胚胎发育过程中均在近端曲小管（PCT）中表达（图4），并持续至成年阶段（图6B、C）。鉴于每个肾单位仅包含一段近端曲小管，对近端曲小管片段再生情况的评估可近似反映肾单位的再生速率。在Tg(osr2:EGFP)转基因鱼中观察到的标记片段较短且几乎不发生重叠，因此该标记可作为检测肾单位再生速率的有效工具。综上，Tg(osr2:EGFP)斑马鱼的应用极大地推动了肾单位再生数量统计的研究。

随后，本研究旨在探究osr2基因失活对Tg(osr2:EGFP)斑马鱼肾单位再生的潜在影响。为实现这一目标，我们参考构建急性肾损伤（AKI）模型的示意图（图6A），通过腹腔注射成年斑马鱼常用的肾毒性毒素庆大霉素（Gent；浓度2.7 μg/μL，每尾鱼注射20 μL）诱导其发生急性肾损伤[28]。研究结果表明，与未损伤的肾脏相比，TgKI(osr2:GFF)纯合子和杂合子在损伤后4天、6天和8天的肾单位再生速率相近，分别约为18%、50%和80%（图6D-L）。因此，本研究得出结论：与对照组相比，osr2基因失活可能不会影响Tg(osr2:EGFP)斑马鱼的肾单位再生过程。

讨论

转基因技术具有诸多优势，例如便于整合含荧光蛋白和目的基因的片段，从而实现实验动物的早期筛选。本研究利用CRISPR/Cas9敲入技术构建了Tg(osr2:EGFP)斑马鱼品系。研究发现，绿色荧光蛋白（EGFP）在斑马鱼的肾脏、胸鳍和肠道中表达，其表达模式与内源性osr2的表达谱一致。因此，Tg(osr2:EGFP)能够真实反映osr2在体内的表达情况。通过追踪EGFP的表达，我们可以研究近端曲小管（PCT）的发育。综上，Tg(osr2:EGFP)转基因斑马鱼品系的建立为后续研究斑马鱼近端曲小管的发育奠定了重要基础。

肾脏的近端曲小管（PCT）在肾小管内电解质和水平衡的分泌、重吸收及维持过程中发挥关键作用。然而，目前仍缺乏标记PCT发育的转基因鱼系。由肾脏特异性启动子（cdh17和enpep）驱动的两种荧光标记转基因品系Tg(pt305 (cdh17:EGFP))和Tg(enpep:GFP)可以标记近端小管（PT），但这些转基因品系在其他肾小管细胞中也会发出荧光。由石斑鱼gtshβ启动子驱动的转基因斑马鱼品系Tg(gtshβ:GFP)在垂体和肾脏中表达绿色荧光蛋白（GFP），并能标记PCT和近端直小管（PST）节段的发育细节。不过，目前仍缺乏能清晰标记PCT的内源性斑马鱼品系。本研究通过重新分析先前发表的单细胞RNA测序（scRNA-seq）数据（GSE100910），发现osr2是标记PCT的新型标志物（图1）。已有研究表明osr2参与肾脏发育，此外，osr2在肾脏中的表达时间早于slc20a1a，这使其能更好地追踪PCT的形态发生。因此，构建Tg(osr2:EGFP)转基因斑马鱼品系为追踪PCT的形态发生提供了极具价值的工具。

肾单位是结构高度复杂的组织，且彼此紧密相邻，这使得肾单位计数工作颇具挑战性。此前的肾单位计数方法，如原位杂交技术，虽已得到应用，但操作复杂且耗时。另一种方法是使用40千道尔顿的荧光素异硫氰酸酯-葡聚糖，这种物质可被导管细胞摄取，进而实现肾单位计数。不过，该方法标记的片段过长，给肾单位计数带来了困难。相比之下，Tg(osr2:EGFP)转基因鱼能够标记近曲小管片段，其标记的片段更短且重叠度更低，因此非常适用于肾单位计数。

为构建TgKI(osr2:GFF)斑马鱼品系，研究人员借助CRISPR/Cas9技术将供体质粒插入斑马鱼基因组（基因组定位：GRCz11；16号染色体：54404070–54404071；基因ID：ENSDARG00000038006）（图2A-E）。随后，将该品系与Tg(UAS:EGFP)斑马鱼杂交，获得Tg(osr2:EGFP)品系（图2F、G）。值得注意的是，osr2完整阅读框的破坏会导致osr2基因失活。尽管如此，本研究发现osr2基因失活的TgKI(osr2:GFF)斑马鱼胚胎发育过程中未出现明显异常（图5）。为探究osr2基因失活对肾单位再生的影响，研究人员通过腹腔注射庆大霉素诱导成年斑马鱼发生急性肾损伤（AKI），并对肾单位再生情况进行评估。结果显示，osr2基因失活并未影响成年斑马鱼的肾单位再生（图6）。基于上述研究结果，我们认为osr2基因失活可能对斑马鱼近端曲小管（PCT）的发育和再生无显著影响。

在此，TgKI(osr2:GFF)纯合子和杂合子均能正常生长至成年并正常繁殖。osr2基因失活的斑马鱼未观察到明显缺陷；然而吗啉代实验的数据却得出了相互矛盾的结果，部分研究表明存在缺陷，而另一些研究则未发现此类异常。因此，我们需要排除吗啉代的副作用。此外，当基因突变导致功能完全丧失时，会发生遗传补偿反应，促使机体增加其他基因的表达以替代其功能，从而维持正常的发育和存活。在斑马鱼、小鼠或拟南芥等多种生物中，由基因敲除突变触发的遗传补偿反应被发现是促成遗传稳健性的一种机制。为了确定osr2功能丧失是否因遗传补偿效应而未影响斑马鱼的生长，我们检测了osr2旁系同源基因osr1的转录水平，发现osr1的转录水平未发生变化（图5K）。本研究结果既无法排除吗啉代寡核苷酸的副作用，也无法排除遗传补偿反应的影响。因此，osr2是否影响肾脏发育仍需后续的详细研究。

本研究利用CRISPR/Cas9敲入技术成功构建了Tg(osr2:EGFP)斑马鱼品系。该品系可通过追踪EGFP信号，动态观察原肾管近端曲小管（PCT）整个生命周期的发育过程，是极具价值的研究模型。此外，该转基因鱼系还可实现肾单位再生的定量分析。总体而言，Tg(osr2:EGFP)斑马鱼品系是筛选与PCT发育相关突变体的理想工具，同时也可用于靶向PCT发育及相关疾病的潜在药物筛选。

关于木芮生物ABOUT MURUIBIO

苏州木芮生物科技有限公司（以下简称“木芮生物”）成立于2018年1月22日，是一家致力于以斑马鱼为模式生物提供生物医学基础科研服务、斑马鱼实验操作试剂盒、斑马鱼临床疾病模型、其他生物学实验试剂以及进行斑马鱼应用技术转化的高科技公司。木芮生物以斑马鱼为模式生物，建立起了上百种的临床疾病模型，深入探索相关疾病发生的深层次疾病机制， 进而为临床治疗疾病提供可行的治疗方案或者药物筛选机制。到目前为止，木芮生物已经建立起包括遗传、行为、 细胞、 生化分子等斑马鱼相关成熟的技术，并且依托这些技术成功将斑马鱼应用到基础科研、毒理测试、癌症药物筛选、 中药药效成分筛选、保健品开发和功效评价。木芮生物经过七年的快速发展，公司现已有核心创业团队成员20余人，其中博士研究生1人，硕士研究生6人，本科生10余人。木芮生物成立后，陆续与江苏省产业研究院和苏州纳米应用技术研究所等科研单位建立起了科研合作，建立了“模式生物技术与应用研发中心”；公司于2020年被认定为“国家高新技术企业”，于 2021年底获得苏州工业园区“领军成长企业”称号。