细胞凋亡实验

【服务简介】

细胞凋亡通常称为细胞程序性死亡，是由基因控制的主动性细胞死亡过程。越来越多数据发现，细胞凋亡与多种疾病密切相关，如癌细胞具有连续增殖、抵抗细胞凋亡能力，利用流式细胞仪分析细胞凋亡可为肿瘤诊断，疗效评价和预后预测提供了重要的参考指标。

Annexin V和PI双染法是流式检测细胞凋亡的经典方法，它是基于凋亡的早期细胞膜上的磷脂酰丝氨酸（phosphotidylserine, PS）从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面这一原理来实现的。Annexin Ⅴ（膜联蛋白 V）是一种分子量为35-36 kDa的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，能与PS高亲和力结合，将Annexin V 进行荧光素FITC标记，利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。碘化丙啶（Propidium, PI）是一种可与DNA结合的染料，它不能透过正常细胞或早期凋亡细胞的完整的细胞膜，但在凋亡中晚期的细胞和死细胞，PI 能够透过细胞膜而使细胞核红染。将Annexin V与PI联合使用时，便可用来鉴别活细胞，凋亡细胞及死亡细胞。

【实验案例】

Annexin V和PI双染法实验案例，图中绿色荧光代表正常和凋亡早期的细胞。红色为调往中后期的细胞

【应用场景】

1. 药物处理肿瘤细胞，收集细胞，进行染色，通过流式细胞仪或者免疫荧光检测细胞的凋亡情况，以此来判断肿瘤细胞对该药物的耐受能力。