qRT-PCR实验

【服务简介】

荧光定量PCR技术于1996年由美国Applied Biosystems公司推出，由于该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃，而且与常规PCR相比，它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点，目前已得到广泛应用。 荧光定量PCR技术是通过荧光染料或荧光标记的特异性探针，对PCR产物进行标记跟踪，实时监控反应过程。随着PCR 反应的进行，反应产物不断累积，荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环，收集一次荧光强度信号，这样就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化，结合相应的软件对产物进行分析，可以得到荧光扩增曲线，计算待测样品初始模版的量。实时荧光定量PCR技术是一次由定性技术向定量技术的飞跃，运用该项技术，可以对DNA、RNA样品进行相对定量、绝对定量和定性分析。

【实验案例】

RTPCR案例，图示为处理后目的基因转录水平mRNA表达量的改变

【应用场景】

1. 临床上病原微生物检测、支原体检测、病毒核酸检测

2. 分子生物学中，检测目的基因RNA水平的表达情况，通过药物处理或者其他处理基因的表达改变研究基因的调控方式和功能。