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斑马鱼聚群测试(SLT)行为实验

斑马鱼聚群测试(SLT)行为实验

聚群测试(Shoaling test,SLT)是基于斑马鱼的天然浅滩凝聚力设定,研究表明浅滩凝聚力和焦虑反应之间存在相关性。聚群测试检查群体凝聚力(如浅滩面积和平均鱼间距离)暴露于慢性压力会减少成年斑马鱼的社会互动,表现为社会偏好测试中接近同种的时间更短,聚群测试中平均鱼间距离更短。


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聚群测试(Shoaling test,SLT)是基于斑马鱼的天然浅滩凝聚力设定,研究表明浅滩凝聚力和焦虑反应之间存在相关性。聚群测试检查群体凝聚力(如浅滩面积和平均鱼间距离)暴露于慢性压力会减少成年斑马鱼的社会互动,表现为社会偏好测试中接近同种的时间更短,聚群测试中平均鱼间距离更短。



斑马鱼聚群测试(SLT)行为实验



【服务简介】


类焦虑行为是实验室实验中常用的测量方法,其中焦虑是通过对感知或预期威胁表现出特定反应的行为来推断的。在动物中,恐惧或焦虑通常表现为肌肉紧张增加、回避或逃避行为以及自主活动的增加或激增。聚群测试(Shoaling test,SLT)是基于斑马鱼的天然浅滩凝聚力设定,研究表明浅滩凝聚力和焦虑反应之间存在相关性。聚群测试检查群体凝聚力(如浅滩面积和平均鱼间距离)暴露于慢性压力会减少成年斑马鱼的社会互动,表现为社会偏好测试中接近同种的时间更短,聚群测试中平均鱼间距离更短。


实验中准备 650px×125px×500px 的玻璃水缸,测试时将6条斑马鱼放入水缸中,让斑马鱼在水缸里自由游动,由 A、B实验人员在未知分组的情况下在 3 min 后每隔十秒用电脑拍摄照片,共拍摄6次。斑马鱼成群(鱼群)被释放到圆形场地中。当浅滩探索竞技场时,通过测量个体间距离和最近邻距离来计算浅滩密度。在这项测试中,浅滩密度的降低被认为表明焦虑的减少。浅滩测试装置是一个白色塑料圆筒(直径35.0厘米),填充水深5.0厘米。每个浅滩由5条鱼组成,被释放到测试场地的中心。竞技场围绕竞技场中心均匀地隔离成圆形中心区域,周围环绕着环形过渡区和趋触区。行为被记录15分钟。通过速度和不动时间来分析浅滩行为。通过确定每条鱼的平均速度之和并将总数除以浅滩中鱼的数量来计算浅滩的平均速度。


 浅滩测试


SLT实验中发现模型组斑马鱼组内平均距离明显缩短,表现出很强的浅滩凝聚力。由此可见,CUS 模型下斑马鱼表现出来的对新鲜环境的探索能力减弱等抑郁样行为表现与人类的抑郁症状较为相似。


 斑马鱼SLT行为测试结果


评估


计算每条鱼的平均累积静止时间,然后除以浅滩中的鱼总数,以确定浅滩的平均静止时间。用 Image-J 软件测算图片中鱼个体之间的距离以及每组斑马鱼之间的平均距离,对数据进行汇总整理,以此表明斑马鱼的社会行为。比较各组斑马鱼个体之间平均间距(Individual distance),平均距离越低,越表现出很强的浅滩凝聚力。


参考文献

Cachat J, Stewart A, Grossman L, et al. Measuring behavioral and endocrine responses to novelty stress in adult zebrafish [J]. Nat Protoc, 2010, 5(11): 1786-1799.

Fontana B D, Stefanello F V, Mezzomo N J, et al. Taurine modulates acute ethanol-induced social behavioral deficits and fear responses in adult zebrafish [J]. J Psychiatr Res, 2018, 104: 176-182.

Peng Y, Su Y, Jiang Y. Effect of the warming and tonifying kidney- yang recipe on monoamine neurotransmitters and pathological morphology of hippocampus tissue in depression model rats [J].Technology and health care: official journal of the European Society for Engineering and Medicine,2020, 28(2): 1-8.

Johnson, A., Loh, E., Verbitsky, R. et al. Examining behavioural test sensitivity and locomotor proxies of anxiety-like behaviour in zebrafish. Sci Rep 13, 3768 (2023).