斑马鱼慢性不可预测应激（CUS）行为实验

【服务简介】

目前慢性不可预测应激（CUS）是啮齿动物最常用的抑郁实验模型之一，它可以模仿在焦虑、抑郁以及相关情绪障碍患者中观察到的许多行为特征。对慢性压力的最初反应是焦虑，之后是抑郁，并且这些精神障碍是其他身体疾病（如炎症性肠病）不可否认的危险因素。因此必须开发更简单的模型来研究慢性压力对大脑的影响，并确定其可有效用于 CNS 药物的筛选。慢性不可预测应激（CUS）是一种广泛使用的抑郁实验模型，其中啮齿动物受到一系列慢性压力源的影响，例如约束、拥挤、隔离、温度变化、光线、噪音和/或捕食者暴露等。作为啮齿动物研究的补充，斑马鱼正在成为评估情感障碍（焦虑和抑郁等）病理生物学机制的强大模式生物。

实验中采用禁食、驱逐应激、密集拥挤、社交隔离等应激源建立抑郁斑马鱼模型，后续可通过行为学测定以及单胺神经递质含量分析，对模型的可行性和有效性进行评价。同时在经过一系列 CUS 后，实验动物会表现出神经内分泌功能的改变。

应激试验过程

1. 禁食24h

2. 黑暗环境处理24h

3. 红桶拥挤应激8h，转移回水箱

4. 暴露于攻击性鱼（2条成年蓝曼龙）24h

5. 明暗应激处理12h→30%浅水应激12h

6. 社交隔离8h→禁食24h

7. 0.5L三色杯拥挤应激6h

8. 红桶应激，同时强光照射，加入10L攻击性鱼的养殖水

9. 20%浅水应激加黑暗处理24h

10. 红桶应激，加入30mL从斑马鱼体表刮取的警示信息素暴露8 h

11. 置于1.5L新型水箱中进行密集拥挤环境应激6h→加入10%攻击鱼养殖水

12. 明暗应激处理8h→60%浅水应激+强光照射2h

13. 鱼网追逐20min，黑暗处理24h

14. 暴露于攻击性鱼24h

15. 更换60%水→三色杯应激8h→添加10%同类鱼养殖水

16. 添加40mL警示信息素，在22℃水中于强光灯照射下，摇床（60rpm）震荡6h

17. 社交隔离8h→黑暗处理16h

18. 30%浅水暴露8h，添加捕食者养殖水10L

19. 明暗箱应激5min→暴露于空气中1min，重复3次→两条蓝曼龙处理24h

20. 黑暗与禁食24h

21. 三色杯且强光照射6h→50%浅水暴露6h

22. 社交隔离8h→鱼网驱逐15min→添加10%捕食者养殖水

23. 空气暴露→1条蓝曼龙应激5h→加入警示信息素

24. 更换50%水，禁食24h

25. 黑暗处理24h

26. 30%浅水和强光照射2h→红桶应激6h

27. 暴露于2条成年蓝曼龙24h

28. 强光照射加拥挤应激→警示信息素暴露6h

29. 禁食24h

30. 鱼网追逐15min→5L小水箱拥挤且强光应激20min→冰块局部低温应激→30%浅水应激24h

31. 三色杯应激8h→添加10%捕食者养殖水

32. 明暗箱（15条/L）应激8h→60%浅水暴露16L

33. 红桶应激8h

34. 黑暗且禁食处理24h

35. 拥挤（30条/L）加强光应激8h→暴露于红色斑马鱼14h

 实验流程简图

参考文献

Fonseka T M, Wen X Y, Foster J A, et al. Zebrafish models of major depressive disorders [J]. J Neurosci Res, 2016, 94(1): 3-14.

胡国俊. 丙戊酸钠对慢性不可预知应激诱导斑马鱼抑郁模型的改善作用及机制研究[D].西南大学,2023.DOI:10.27684/d.cnki.gxndx.2022.002756.

Owens M J, Nemeroff C B. Role of serotonin in the pathophysiology of depression: focus on the serotonin transporter [J]. Clin Chem, 1994, 40(2): 288-295.