流式细胞周期

【服务简介】

细胞周期(Cell Cycle)是指细胞从一次分裂完成开始到下一次分裂结束所经历的全过程，细胞的遗传物质复制并均等地分配给两个子细胞。细胞周期分为间期与分裂期两个阶段。间期又分为三期：即DNA合成前期(G1期)、DNA合成期(S期)与DNA合成后期(G2期)。某些细胞在分裂结束后暂时离开细胞周期，停止细胞分裂，执行一定生物学功能(G0期)。

流式细胞仪PI染色法检测细胞周期的原理：由于细胞周期各时相的DNA 含量不同,通常正常细胞的G1/ G0 期具有二倍体细胞的DNA含量(2N) ,而 G2/ M 期具有四倍体细胞的DNA 含量(4N) ,而S期的DNA 含量介于二倍体和四倍体之间。PI(碘化丙啶)为插入性核酸荧光染料，能选择性嵌入核酸DNA和RNA双螺旋的碱基之间与之结合，结合量与DNA的含量成正比关系，其荧光强度直接能反映细胞内DNA含量。因此,通过流式细胞仪PI染色法对细胞内DNA含量进行检测时,可以将细胞周期各时相区分为G1/G0 期,S 期和G2/M 期,获得的流式直方图对应的各细胞周期可通过特殊软件计算各时相的细胞百分率。

实验流程：

收集细胞-PBS洗涤细胞-固定过夜-PBS洗涤细胞-去除RNA-荧光标记-上机检测

送样运输要求：

细胞周期检测需要细胞量比较多，6 孔板送样要求汇合度在70%以上，但不能超过90%。

细胞消化后用-20℃预冷的70%乙醇吹散混匀，4℃固定过夜，封口膜封好，4℃运输寄到实验室。

仅供科研用途，不可用于临床诊断！